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  • 上海遠慕生物科技有限公司

    遠慕講述:維生素C含量的測定實驗
    點擊次數:1505 更新時間:2018-09-14

          維生素c是人類營養中重要維生素之一,缺乏時會產生壞血病。水果、蔬菜是供給人類維生素c的主要來源。通過對維生素c含量的測定,可以了解果品質量的高低,并掌握這一測定方法。利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化劑,可將還原態的維生素c氧化成脫氫維生素c,而染料本身被還原成無色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性條件下呈紅色。

     

    實驗方法原理:

          利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化劑,可將還原態的維生素c氧化成脫氫維生素c,而染料本身被還原成無色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性條件下呈紅色。在滴定終點之前,滴下的2,6-二氯酚淀粉立即被還原成無色。當溶液從無色轉變成為紅色時,即為滴定終點。

     

    實驗步驟:

    一、試劑

    1. 實驗材料:水果或蔬菜。

    2. 儀器:(1)微量滴定管;500毫升×1;(2)量瓶:50毫升×2;(3)三角瓶;500毫升×2;(4)研缽;(5)量筒; (6)刻度吸管;10毫升×2;

    3. 試劑:

    (1)1%草酸:秤取5.0克草酸溶于少量蒸餾水中,定容至500毫升。

    (2)2%草酸:秤取10.0克草酸溶于少量蒸餾水中,定容至500毫升。

    (3)0.001n 2,6-二氯酚靛酚鈉溶液:稱取干燥的2,6-二氯酚靛酚鈉60毫克,放入200毫升量瓶中,加熱蒸餾水中100-150毫升,滴加0.01n naoh4-5滴,強烈搖動10分鐘冷卻后加水至刻度。搖勻后用緊密濾紙濾于棕色瓶中,貯于冰箱中備用,有效期一周。使用前需標定.

    實驗過程

    1. 樣品的處理和提取:

    稱取4.0克新鮮樣品,至研缽中,加5毫升2%草酸,研成勻漿。通過漏斗將樣品提取液轉移到50毫升量瓶中。殘渣再用2%草酸提取2-3次,提取液及殘渣一并轉入量瓶。2%草酸總量為35毫升,后以水定容。溶液定容時若泡沫較多,可加幾滴乙醇消除泡沫后再定容。搖勻,過濾,濾液備用。

    2. 樣品的測定:

    吸取濾液10毫升,放入50毫升三角瓶中,立即用2,6-二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明顯的紅色,并在15秒內不消失為止。記錄所用滴定液體積。

    3. 空白測定:

    在另一50毫升三角瓶內,放入35毫升2%草酸,并用1%草酸定溶,搖勻,取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶內,用2,6-二氯酚靛酚鈉滴定至終點,記錄染料用量。


    x:100克樣品所含維生素c毫克數(毫克/100克)

    w:稱取樣品重(克)

    v1:滴定樣品所用染料毫升數

    v2:滴定空白所用染料毫升數

    v:樣品提取液稀釋之總體積(即50毫升)

    k:1毫升染料液所能氧化維生素c之毫克數,可由標定算出     

     

    注意事項:

          mso-bidi-language:ar-sa">二氯酚靛酚鈉溶液的標定:準確稱取維生素c20毫克,用1%草酸溶解定容至200毫升。吸取此液10毫升,以1%草酸再次稀釋定容至200毫升。吸取此液10毫升,放入50毫升三角瓶中(同時吸取10毫升1%草酸于另一個50毫升三角瓶中,做空白對照立即用所要標定的2,6-二氯酚靛酚鈉滴定至粉紅色出現15秒不消失,記錄所用毫升數,按下式計算k值(即1毫升染料所能氧化抗壞血酸的毫克數)。

     
    (式中:g為稱取維生素c的毫克數。v為滴定10毫升標準維生素c時所用去染料的毫升數,與滴定空白所用毫升數之差值)

    2. 操作要盡可能快,并防止與鐵銅器具接觸,以減少維生素c的氧化。

    3. 草酸及樣品的提取液避免日光直射。

    4. 當樣液本身帶色時,測定前于提取液中加2-3毫升二氯乙烷。在滴定過程中當二氯乙烷由無色變粉紅色時,即達終點。


     

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