煙酰胺腺嘌呤二核苷酸是一種轉遞質子（更準確來說是氫離子）的輔酶，它出現(xiàn)在細胞很多代謝反應中。NADH或更準確NADH + H+是它的還原形式。它可以被還原，多攜帶兩個質子（寫為NADH + H+）。NAD+是脫氫酶的輔酶，如乙醇脫氫酶(ADH)，用于氧化乙醇。它在糖酵解、糖異生、三羧酸循環(huán)及呼吸鏈中發(fā)揮著不可替代的作用。中間產(chǎn)物會將脫下的氫遞給NAD，使之成為NADH + H+。而NADH + H+則會作為氫的載體，在呼吸鏈中通過化學滲透偶聯(lián)的方式，合成ATP。 在吸光方面，NADH+H+在260nm和340nm處各有一吸收峰，而NAD+則只有260nm一處吸收峰，這是區(qū)別兩者的重要屬性。這同時也是很多代謝試驗中，測量代謝率的物理依據(jù)。NAD在260nm的吸光系數(shù)為1.78*104L /(mol*cm)，而NADH在340nm的吸光系數(shù)為6.2*10? L/(mol*cm)。
生產(chǎn)方法:
1.從鮮酵母提取，步驟如下：新鮮壓榨酵母[破壁，提取]提取液[分離]濾液[一次吸附][洗脫]一次洗脫液[中和][二次吸附][洗脫][三次吸附][洗脫]三次洗脫液[沉淀][過濾][干燥]輔酶I
2.以酵母為原料
破壁、提取、分離 將新鮮壓榨酵母攪拌下加入等量的沸水，加熱至95℃保溫5min，迅速加入兩倍酵母質量的冰塊，過濾，濾餅用水洗滌2次，合并濾液和洗液，加入強堿性季銨I型陰離子交換樹脂201×7(717)，攪拌16h，過濾，收集濾液。
新鮮壓榨酵母[沸水、冰塊]→提取液[201×7樹脂]→濾液
吸附、洗脫 濾液用濃鹽酸調pH=2-2.5，經(jīng)弱酸性丙烯酸系陽離子交換樹脂122柱吸附，用無熱原水洗至流出液澄清為止，再用0.3mol/L氫氧化銨溶液洗脫，當流出液呈淡咖啡色，經(jīng)340nm分光光度計測定吸光度大于0.05時，開始收集，流出液呈淡黃色時停止，得洗脫液。
濾液[pH2-2.5]→吸附物→洗脫液
中和、吸附 將強酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂001×7(732)加至洗脫液中，攪拌測pH=5-7，過濾，濾餅用無熱原水洗滌，合并洗液和濾液，加稀氨水調pH值至7(約15%)，再用強堿性季銨I型陰離子交換樹脂201×7 (717)50-60目柱進行吸附，用無熱原水洗至流出液澄清無色為止。
洗脫液[001×7樹脂，氨水，201×7樹脂]→[pH7]吸附物
洗脫、吸附、洗脫 將766型活性炭60-80目柱與201×7樹脂柱串聯(lián)，用0.1mol/L氯hua鉀溶液洗脫，洗脫液立即流經(jīng)活性炭柱進行吸附，吸附完后解除兩柱串聯(lián)，用pH9的無熱原水洗滌，再用pH8的4%乙醇洗滌，后用無熱原水洗至中性，用體積比為丙酮：乙酸乙酯：水：濃氨水=4：1：5：0.02的混合液洗脫，當洗脫液加3倍丙酮產(chǎn)生白色渾濁時，收集洗脫液。
吸附物[201×7樹脂柱，氯hua鉀，766型活性炭]→洗脫液[活性炭柱]吸附物[無熱原水，乙醇]→[洗至中性]吸附物[丙酮，乙酸乙酯，水，濃氨水]→洗脫液
沉淀、干燥 洗脫液在攪拌下加30%-40%硝酸調pH=2-2.5，過濾，冰庫過夜，過濾，95%的冷丙酮洗滌，真空干燥，得成品。
洗脫液[硝酸]→[pH2-2.5, 0℃]沉淀[丙酮]→[干燥]C0I成品。
