植物樣品的采取、處理與保存
點擊次數(shù)：671 更新時間：2021-10-26
生物化學(xué)分析的準(zhǔn)確性，除取決于分析方法的選擇是否合適以及全部分析工作是否嚴(yán)格按照要求進行外，在很大程度上還取決于樣品的采取是否有最佳的代表性。如果不遵循科學(xué)方法采樣，樣品缺乏代表性，即使分析工作嚴(yán)謹(jǐn)無誤，也得不到正確的結(jié)論。因此，必須對樣品的采取、處理和保存給予足夠的重視。
從大田或?qū)嶒炋锊苫氐臉悠罚话銛?shù)量較大，稱為“原始樣品”。再按原始樣品的種類(如根、莖、葉、花、果實等)分別選出“平均樣品”。再根據(jù)分析任務(wù)的要求和樣品的特征，從平均樣品中選出供分析用的“分析樣品”。由此可見，分析樣品的獲得須經(jīng)一系列復(fù)雜而仔細(xì)的步驟，在實際工作中一定要以高度認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度對待。
（一）原始樣品及平均樣品的采取、處理與保存
原始樣品及平均樣品的采取，按分析目的可有兩種方法：一種是為了鑒定品質(zhì)而進行的混合取樣；另一種是按植物生育期取樣。
1.混合取樣法：一般種子樣品可用混合取樣法。把代表一定面積的收獲物先經(jīng)脫粒，然后在木板或牛皮紙上鋪成均勻的一層，再按對角線把樣品分成4 個三角形，取兩個相對的三角形的樣品，而將另外兩個三角形的樣品淘汰。如此操作，一直淘汰至所要求的數(shù)量為止。這個取樣法叫做“四分法”，這樣取得的平均樣品在實驗室經(jīng)適當(dāng)處理即可制成分析樣品。
豆類及油料種子選取平均樣品的方法與谷類種子取樣法相同。注意，樣品中不要有未成熟的種子或混雜物，不要將簸出去的種子加到平均樣品中。
如果直接從田里采取植株樣品，在生長均一的情況下，可按對角線或沿平行的直線等距離采樣。如果植株長勢不均勻，則應(yīng)根據(jù)生長的強弱，按比例采取大約5 個點的樣品后混合。每個樣點取的植株數(shù)隨植物的種類和采樣的時間有所不同。如小麥等密植型作物或其它作物幼苗，可按面積采取或采取樣品束(一束樣品的植株數(shù)視需要而定)，象玉米、甘蔗等作物，每個樣點采取一株就夠了。
選取甘薯、馬鈴薯、甜菜、蘿卜等塊根、塊莖的平均樣品時，必須注意到大、中、小三類樣品的比例。然后縱切取其一部分(二分之一至四分之一)組織作為平均樣品，否則就不具有代表性。
一般蔬菜樣品也按對角線法采取。番茄樣品應(yīng)選擇簇位相同、成熟程度一致的果實，取果實的1/4 組成平均樣品。
采取蘋果、梨、桃、柑橘等水果的平均樣品時，一般選1～3 株果樹為代表，從植株的全部收獲物中選取大、中、小果實以及向陽、背陽部分的果實混合成平均樣品。葡萄等漿果，采樣時可在不同地點的5～10 株植物上的各個部位包括向陽、背陽以及上、下各部位采樣。
2.按生育期取樣法：在幼苗期取樣，因植株較小，采取的株數(shù)就比較多，盡管各種作物有所不同，總的原則是所取樣品的干重應(yīng)當(dāng)是分析用的2 倍。
植株逐漸長大，每次采取的株數(shù)也相應(yīng)減少，但絕不能采單株作樣品。在各個生育期取樣時，都應(yīng)作觀察記錄。
取樣地點一般在邊行區(qū)，取樣點的四周不應(yīng)有缺株現(xiàn)象。
取樣后，按分析目的分成各個部分，如根、莖、葉、穗等，然后捆好，附上標(biāo)簽，分別裝入樣品袋。
瓜果、蔬菜取回后因水分較多，容易霉?fàn)€，可在冰箱中冷藏，或用于干燥滅菌，或用酒精處理或烘干，以供分析之用。
（二）分析樣品的處理與保存
采回的新鮮植株樣品如果混有泥土，不應(yīng)用水沖洗，可用濕布擦凈，然后置空氣流通處風(fēng)干或烘干。烘干樣品時，可把植株放入80℃烘箱中，以停止酶活動并驅(qū)除水分。烘干樣品時，注意溫度不能過高，以免把植株烤焦。最好不要曬，以免灰塵沾染或被風(fēng)刮走。
全植株樣品應(yīng)按照根、莖、葉、種子等分開。果實必須剖出時，要用鋒利的不銹鋼刀子，不允許將其中汁液流失。
為了避免糖、蛋白質(zhì)、維生素等成分的損失，可采用真空干燥或冷凍真空干燥法。風(fēng)干或烘干的樣品，根據(jù)其特點分別進行以下處理：
1.種子樣品的處理：一般谷物種子的平均樣品可用電動樣品粉碎機粉碎。事先要把機器內(nèi)收拾干凈，最初粉碎出的少量樣品可棄去不用，然后正式粉碎，使全部樣品通過一定篩孔的篩子，混合均勻，按四分法取出一定數(shù)量的樣品細(xì)粉作為分析樣品，貯存于干燥的磨口廣口瓶中，同時貼上標(biāo)簽，注明樣品的名稱、編號、采取地點、處理、采樣日期和采樣人姓名等。長期保存時，標(biāo)簽應(yīng)涂石蠟，并在樣品中加適當(dāng)?shù)姆栏瘎?br />
蓖麻、芝麻等油料種子應(yīng)取少量樣品在研缽內(nèi)研碎，以免脂類損失。
2.莖稈樣品的處理：干燥后的莖稈樣品也要磨碎。粉碎莖稈的粉碎機不同于種子粉碎機，其切割部分由幾付排列方向相反的刀片組成。粉碎后的樣品按上法保存。
3.多汁樣品的處理：一般多汁樣品，如瓜果蔬菜等，其化學(xué)成分(糖、蛋白質(zhì)、維生素等)在保存中易發(fā)生變化，往往多用新鮮樣品進行各項測定。將它們的平均樣品切成小塊，放入電動組織搗碎機中打成勻漿，如果樣品含水量較少，可按樣品重量加入適量水，然后搗碎。樣品量少時可用手持勻漿器或在研缽內(nèi)研磨，必要時可在研缽內(nèi)加少量石英砂。
如果所測物質(zhì)不穩(wěn)定(如某些維生素和酶等)，則上述操作均應(yīng)在低溫下進行。樣品勻漿如來不及測定，可暫存冰箱內(nèi)，或滅菌后密封保存。
4.丙酮干粉的制備：在分離、提純或測定某種酶的活力時，丙酮干粉法是常用的有效方法之一。
該種方法是將新鮮材料打成勻漿，放入布氏漏斗，按勻漿重量緩慢加入10倍的低溫冰箱內(nèi)冷卻到-15℃～-20℃的丙酮，迅速抽氣過濾，再用5 倍冷丙酮洗3 次，在室溫下放置1 小時左右至無丙酮氣味，然后移到盛有五氧化二磷的真空干燥器內(nèi)干燥。丙酮干粉的制備在低溫下完成，所提丙酮干粉可長期保存于低溫冰箱。用這種方法能有效地抽提出細(xì)胞中的物質(zhì)，還能除掉脂類物質(zhì)，免除脂類干擾，而且使得某些原先難溶的酶變得溶解于水。
