免疫標記分析技術(shù)主要包括：放射物標記、酶標記、發(fā)光標記、熒光標記和金標記方法。
1 放射物標記分析：
用放射物標記抗原或抗體發(fā)展的放射免疫分析(radio immunoassay, RIA)是美國科學Yalow
和Berson于1959年創(chuàng)立的一種微量分析法,它是將具有高靈敏度的放射性核素示蹤技術(shù)和特異性免疫化學技術(shù)相結(jié)合而建立的新方法。該技術(shù)利用核素標記物的放大效應(yīng),改善了待測物的檢測下限,同時以抗體或抗原作為結(jié)合試劑,大大提高了檢測方法的特異性。
2 熒光標記分析：
以熒光標記的熒光免疫分析(fluorescein immunoassay, FIA)是由Conn等首/創(chuàng)于20世紀40年代的一種標記免疫學技術(shù),其所用標記物是熒光素和熒光染料,是將抗原或抗體標記以熒光物質(zhì)與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡或紫外線照射下,檢測熒光強度和熒光現(xiàn)象的一種檢測方法。熒光標記免疫法靈敏度高,但熒光素常會產(chǎn)生生物學毒性,導致抗體或抗原的靈敏度和選擇性下降
3.酶標記分析技術(shù)：
是繼免疫熒光抗體技術(shù)和放射免疫分析之后發(fā)展起來的一大新型的血清學技術(shù)。1966年，Nakane等和Avrameas等分別報道用酶代替熒光素標記抗體，建立了酶標抗體技術(shù)(enzyme-labelled antibody technique)，用于生物組織中抗原的定位和鑒定。1971年，Engvall Van Weemen等報道了酶聯(lián)免疫吸附試驗，從而建立了酶標抗體的定量檢測技術(shù)。20世紀80年代，基于酶標記抗體檢測和鑒定蛋白質(zhì)分子的免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)問世。目前，免疫酶標記技術(shù)已成為免疫診斷、檢測和分子生物學研究中應(yīng)用*泛的免疫學方法之一。
4.發(fā)光標記分析
20世紀80年代末,國外開始用化學發(fā)光試劑來標記抗原或抗體,從而建立了發(fā)光免疫分析技術(shù)。狹義的發(fā)光免疫分析( luminescence immunoassay,LIA )主要是指化學發(fā)光免疫分析(chemiluminescence immunoassay, CLIA)。另外,還有酶放大化學發(fā)光免疫分析和電化學發(fā)光免疫分析( electrochemiluminescence immunoassay , ECLIA)。CLIA是Sohrocler和Halman在20世紀70年代末期建立的,該方法兼有發(fā)光分析的高靈敏度和免疫反應(yīng)的特異性。其基本原理同酶標記分析法,是用化學發(fā)光反應(yīng)的試劑(可以是發(fā)光劑或催化劑等)標記抗原或抗體,
標記后的抗原和抗體與待測物經(jīng)過一系列的免疫反應(yīng)和理化步驟(如離心分離、洗滌等),最后以測定發(fā)光強度形式測定。
5 超順磁微粒標記分析
以磁性粒子標記的磁性免疫分析技術(shù)(Magnetic Immuno Chromatofraphic Tes,tMICT)是現(xiàn)代物理學與生物技術(shù)結(jié)合研發(fā)生產(chǎn)的磁性分析檢測技術(shù),最早應(yīng)用于基礎(chǔ)醫(yī)學領(lǐng)域[13,14]。與其它標記技術(shù)不同,該技術(shù)一個顯著的優(yōu)點就是用磁性粒子標記不受有色雜質(zhì)干擾,可用于直接測量血液、食品、污水等有色樣品。其原理是利用超順磁性納米微粒作為標記物,由高靈敏度磁性檢測儀器測定結(jié)合在免疫復(fù)合物上的磁性微粒所產(chǎn)生的局部磁場效應(yīng),從而得出所測分析物的定量結(jié)果。
