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    血涂片制備步驟與注意事項
    點擊次數(shù):4969 更新時間:2022-07-29

    血涂片的制備步驟:

    (1)采血


    靜脈采血后,使用玻璃棒、毛細(xì)管、注射針頭等在距載玻片一端1cm處加1滴抗凝血。

    (2)推片

    左手平執(zhí)載玻片,或放在類似桌子等平坦地方,右手持推片從前方接近血滴,使血液沿推片邊緣展開成適當(dāng)?shù)膶挾龋⒓磳⑼破c載玻片呈 30~45°角,輕壓推片邊緣將血液推制成厚薄適宜的血涂片,血涂片應(yīng)呈舌狀,頭、體、尾清晰可見。

    (3)干燥

    將推好的血涂片在空氣中晃動,使其迅速干燥。天氣寒冷或潮濕時,應(yīng)于37 ℃溫箱中保溫促干,以免細(xì)胞變形縮小。

    (4)標(biāo)記

    在載玻片的一端用記號筆編號。

    (5)染色

    用特種玻璃鉛筆在血膜兩側(cè)畫兩條線,防止染液外溢。再將瑞氏染液滴在血膜上,至染液淹沒全部血膜,染1分鐘。加等量蒸餾水(或緩沖液)與染液混合再染5分鐘。最后用蒸餾水把染液沖掉,用吸水紙吸干,自然干燥后,即可觀察。

    血涂片制備注意事項:

    1、要制備良好的血細(xì)胞涂片,玻片必須干凈。使用玻片時,只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面,以保持玻片清潔、干燥、中性、無油膩。

    2、最好使用非抗凝血制備血涂片,也可用EDTA抗凝血制備。使用抗凝血標(biāo)本時,應(yīng)充分混勻后再涂片。抗凝血標(biāo)本應(yīng)在采集后4h內(nèi)制備血涂片,時間過長可引起中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。

    3、涂片的厚度、長度與血滴的大小、推片與載玻片之間的角度、推片時的速度等有關(guān)。一般認(rèn)為血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚,反之則血膜薄。

    4、血膜應(yīng)厚薄均勻適度,頭尾及兩側(cè)有一定的空隙。如血膜面積太小,可觀察的部分會受到局限,故應(yīng)以在離開載玻片另一端2cm的地方結(jié)束涂抹為宜。一些體積特大的特殊細(xì)胞常在血膜的尾部出現(xiàn)。

    5、血涂片必須充分干燥后方可固定染色,否則細(xì)胞尚未牢固地吸附在玻片上,在染色過程中容易脫落。

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