隨著生命科學(xué)的迅速發(fā)展，細(xì)胞工程愈來(lái)愈受到人們的重視。以昆蟲(chóng)細(xì)胞為對(duì)象的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)生物學(xué)上具有重要的價(jià)值,已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)及生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。昆蟲(chóng)細(xì)胞是農(nóng)業(yè)生物應(yīng)用方面的高新技術(shù)，主要是提取來(lái)自昆蟲(chóng)的一類(lèi)真核細(xì)胞。通過(guò)培養(yǎng)制造宿主的病毒，這些病毒可以引起昆蟲(chóng)流行病，但對(duì)人畜和植物無(wú)害，因而可作病毒殺蟲(chóng)劑。還可以生產(chǎn)某些藥用蛋白。
許多昆蟲(chóng)培養(yǎng)基配方正不斷得到改進(jìn),以使之適于細(xì)胞生長(zhǎng)。一般通用的商品培養(yǎng)基有Grace氏培養(yǎng)基、TC-100、IPL-41、TNM-FH以及經(jīng)改良的哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基TC199-MK等。
細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方的開(kāi)發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲(chóng)細(xì)胞系的生長(zhǎng)。昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補(bǔ)加FBS,血清提供了細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素,使細(xì)胞能健康生長(zhǎng)和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點(diǎn):價(jià)格高；每批血清的質(zhì)量不同,影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和病毒復(fù)制；血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難；血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲(chóng)培養(yǎng)基變得很復(fù)雜。因此,無(wú)論工業(yè)上或?qū)W術(shù)上,開(kāi)發(fā)無(wú)血清培養(yǎng)基都是必然的趨勢(shì)。
由于在無(wú)血清培養(yǎng)基中含有從血清或動(dòng)物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細(xì)胞在無(wú)血清低蛋白或無(wú)蛋白培養(yǎng)基環(huán)境中對(duì)剪切應(yīng)力更為敏感,故需適當(dāng)提高保護(hù)劑的濃度。無(wú)血清培養(yǎng)基的應(yīng)用有時(shí)會(huì)降低重組蛋白的產(chǎn)量,在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi),較高的細(xì)胞生長(zhǎng)密度與相對(duì)較低水平的重組蛋白產(chǎn)量這一事實(shí)表明,促進(jìn)細(xì)胞分裂的因子與促進(jìn)重組蛋白生產(chǎn)的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。無(wú)血清培養(yǎng)基配方還需進(jìn)一步改進(jìn)以便適應(yīng)于重組蛋白的表達(dá)。昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展和關(guān)鍵介紹
