研究經(jīng)驗指出ELISA檢測試劑盒可以用來檢測血清樣本，看有還是沒有某個抗原或抗體，也可以看該抗原或抗體是多還是少，可以比較不同血清樣本之間該抗原/抗體的含量高低。
樣品收集:
1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA.Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3. 細胞培養(yǎng)上清：取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。
4. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測.
6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
7. 樣品收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，1-6月內(nèi)檢測，4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進行檢測。
8. 如果您的樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù)）。
不同批次的ELISA檢測試劑盒在 制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以 避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即 可，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。
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