細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)基有著不可取代的地位。大家知道，血清是的天然培養(yǎng)基，而無(wú)血清培養(yǎng)基也有著功不可沒的作用，被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物細(xì)胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。遠(yuǎn)慕生物為您分析解說(shuō)無(wú)血清培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中的適應(yīng)性：
一、適應(yīng)方法
1.直接適應(yīng)細(xì)胞從血清的培養(yǎng)基為基。
2.連續(xù)的適應(yīng)或脫機(jī)細(xì)胞從血清的培養(yǎng)基為SFM在幾個(gè)步驟。
連續(xù)的適應(yīng)往往是細(xì)胞比直接適應(yīng)嚴(yán)酷少。
二、連續(xù)的適應(yīng)
通道1，75%血清的培養(yǎng)基：25%基
通道2，50%血清的培養(yǎng)基：50%基
通道3，25%血清的培養(yǎng)基：75%基
從75%到100%的變化可能是太緊張的SFM細(xì)胞，可能需要把細(xì)胞2–3通道在10%血清的培養(yǎng)基：90% SFM混合物。大多數(shù)的細(xì)胞系可以被認(rèn)為是*適應(yīng)后100% SFM 3通道。有時(shí)你可能會(huì)得到你過(guò)去的某一步甚至細(xì)胞之前一百% SFM有麻煩。如果發(fā)生這種情況，回去和傳代細(xì)胞2–3次血清前比補(bǔ)充媒體的無(wú)血清培養(yǎng)基。
三、對(duì)無(wú)血清培養(yǎng)的思考
總的來(lái)說(shuō)，在無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞的滲透壓，pH，溫度，機(jī)械力ji端敏感，酶處理。
1.抗生素
不要在無(wú)血清培養(yǎng)基中使用抗生素。如果你這樣做，我們建議您使用5到10倍不到你會(huì)在血清培養(yǎng)基中。這是因?yàn)檠宓鞍讜?huì)結(jié)合一定量的抗生素添加；沒有這些血清蛋白抗生素的水平可能是某些細(xì)胞的毒性。
2.高密度
細(xì)胞必須與活力> 90%適應(yīng)中的生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期。連續(xù)的適應(yīng)可能是必要的。播種文化在一個(gè)更高的密度比正常在各通道在SFM適應(yīng)可以幫助過(guò)程。因?yàn)橛行┎糠值募?xì)胞不可能在新的文化環(huán)境中生存，有更多的細(xì)胞會(huì)增加活細(xì)胞數(shù)進(jìn)一步通道。
3.叢生
細(xì)胞聚集往往發(fā)生在適應(yīng)SFM。我們建議你輕輕地成團(tuán)塊打破他們當(dāng)傳代細(xì)胞。
4.形態(tài)
這是不尋常的在適應(yīng)SFM后見細(xì)胞形態(tài)略有變化。只要倍增時(shí)間和細(xì)胞活性保持良好，在形態(tài)上的細(xì)微變化，不應(yīng)該是一個(gè)值得關(guān)注的理由。
四、對(duì)培養(yǎng)的適應(yīng)
為適應(yīng)SFM的另一種方法涉及使用“條件培養(yǎng)基"。介質(zhì)的細(xì)胞已生長(zhǎng)在一個(gè)完整的通道，如果您選擇這種方法，可以促進(jìn)適應(yīng)如下：
通道1，100%血清的培養(yǎng)基
通道2通道50%中從1:50左右SFM
通道3通道50%中從2:50左右SFM
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