上海遠慕生物科技有限公司

酵母菌菌株的保存與復蘇實驗

實驗材料 酵母菌

試劑、試劑盒 甘油DMSO

儀器、耗材 凍存管

實驗步驟

1.  配制30%的甘油溶液，在每個15 mm×45 mm，4 ml 的帶蓋的凍存管中加入1 ml 甘油溶液，輕輕擰上螺蓋，高壓滅菌15 min。

2.  為了在凍存管中配制凍存菌液，加入1 ml 對數后期或靜止早期的培養液，混勻后置干冰中一段時間，然后轉存到-70℃冰箱中。

3.  復蘇菌株時，可以從凍存管中刮下少量細胞劃在平板上，不要將整個凍存管中的貯存液融化。

4.  細胞也可以按菌懸液加入80 μl DMOS的方式配制凍存菌株，貯存在-70℃。

酵母菌培養實驗

實驗材料 酵母菌

試劑、試劑盒 葡萄糖

儀器、耗材 搖床錐形瓶離心機

實驗步驟

1.  在30℃，氧氣充足和以葡萄糖作碳源的條件下，野生型釀酒酵母菌生長得十分良好。當酵母菌在試管中培養時，接種酵母菌貯液后應輕輕振蕩培養液以便菌體細胞分散均勻。

2.  在作大體積液體培養時，酵母菌在錐形瓶中生長較好，使用瓶底具隔板的燒瓶增加進氧量更有利于酵母菌的生長。

3.  培養酵母菌時很重要的一點就是要保證所有玻璃器皿無任何表面活性劑。還要保持良好的通氣條件，培養液不應超過整個燒瓶總體積的1/5，而且置于300 r/min，30℃恒溫搖床中進行培養。

4.  對于小量制備DNA和RNA，酵母菌可用玻璃或塑料試管培養，在試管中加入三分之一體積的培養基，并固定在搖床平臺上，于350  r/min 轉速振蕩培養。