<label id="3ldvz"></label>

<span id="3ldvz"></span>
<thead id="3ldvz"><optgroup id="3ldvz"></optgroup></thead>

  • <label id="3ldvz"><meter id="3ldvz"></meter></label>
    <span id="3ldvz"></span>
  • 上海遠慕生物科技有限公司

    核酸濃度測定的五種方法介紹
    點擊次數:450 更新時間:2022-12-12

      1、定磷法

      核糖核酸(RNA)含磷量約為9.5%,脫氧核糖核酸(DNA)含磷量約為9.2%,采用定磷法可準確測出磷含量,進而折算出樣品中核酸含量。

      原理:在酸性條件下,定磷試劑中的鉬酸銨以鉬酸形式與樣品中的磷酸反應生成磷鉬酸,當還原劑存在時磷鉬酸立即轉變為藍色的還原產物——鉬藍;鉬藍最大的剛吸收在650-660nm波長處,根據吸光值制作標準曲線,從而確定核酸的濃度。測定范圍在1-10μg

      優缺點:簡單、快速;但易受蛋白與核苷酸的影響。

      2、 定糖法

      原理:核糖中的戊糖可在濃鹽酸或者濃硫酸作用下脫水生成醛類化合物可與某些成色劑縮合成有色化合物,可用比色法或者分光光度法測定其溶液中的吸收值,在一定的濃度范圍內,溶液的吸收值與核酸的含量成正比。

      RNA濃度的測試:RNA與濃鹽酸共熱時發生降解,產生的核糖又可轉變為糠醛,在FeCl3或CuCl2催化下,糠醛與3,5-二羥基甲苯(苔黑酚)反應形成綠色復合物,生成的綠色化合物在670nm處有最大的吸收值。測定范圍在20~250μg

      DNA濃度的測定:脫氧核糖核酸中的脫氧核糖在酸性環境中變成戊醛與二苯胺試劑一起加熱產生藍色化合物,生成的藍色的化合物在595nm處有最大吸收值。測定范圍在20~250 μg

      優缺點:較靈敏,但特異性較差

      3、 紫外吸收法(分光光度法、Nanodrop)

      組成核酸分子的堿基,由于含有芳香環結構,具有紫外吸收的特性。吸收值在波長250-270nm之間,最大吸收波長是260nm。一般1μg/ml

      RNA溶液在1cm光徑比色皿中的光吸收峰值約為0.022,1μg/ml

      DNA溶液的光吸收值為0.020。因此測定未知濃度RNA或DNA溶液在260nm的光吸收值即可計算出其中核酸的含量。

      4、 熒光光度法

      專門配套的熒光檢測技術,只有與DNA、RNA或蛋白質結合后才發出熒光的染料。這些熒光染料只有與特異性的靶分子結合時才能發出熒光信號,采用熒光染料檢測特定目標分子的濃度,可以對DNA和RNA進行精準定量。

      優缺點:靈敏,簡便;價格昂貴

      5、 qPCR法

      使用熒光定量方法中的絕對定量,配套標準品,制作對應的標準曲線,使用熒光定量儀,計算對應的熒光值并轉換對應的核酸濃度。

      優缺點:靈敏度高,誤差小;操作時間長

    上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
    傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網址:www.ylcdjx.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
    主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
    點擊這里給我發消息
    手機:13310162040
    主站蜘蛛池模板: 亚洲w码欧洲s码免费| 亚洲精品无码久久| 少妇中文字幕乱码亚洲影视 | 国产免费伦精品一区二区三区| 国产成人无码区免费网站| 8x8x华人永久免费视频| 日本一道一区二区免费看| 亚洲VA中文字幕无码一二三区| 亚洲一区二区三区久久久久| 国产四虎免费精品视频| 最新精品亚洲成a人在线观看| 亚洲中文字幕无码中文字| 最近免费mv在线电影| 亚洲第一永久在线观看| 国内精品免费在线观看| 亚洲国产成人五月综合网| 亚洲精品无码专区久久| 免费a级毛片永久免费| 在线观看亚洲AV每日更新无码| 毛片视频免费观看| 91亚洲视频在线观看| 免费精品99久久国产综合精品| 亚洲AV日韩AV天堂久久 | 亚洲AV无码精品国产成人| 99久久99这里只有免费费精品| 亚洲一区在线视频观看| 国产成人免费a在线视频app| 亚洲综合一区国产精品| 男人的天堂亚洲一区二区三区 | 国产成人亚洲综合色影视| 一级美国片免费看| 在线成人a毛片免费播放| 久久精品国产亚洲αv忘忧草| 午夜高清免费在线观看| 久久性生大片免费观看性| 亚洲人成网站在线播放影院在线| 丁香花在线视频观看免费 | 相泽亚洲一区中文字幕| 一级毛片完整版免费播放一区| 亚洲精品成人片在线播放| 精品视频在线免费观看|