血液瓊脂培養基的制備實驗方法
點擊次數：533 更新時間：2023-03-30
實驗方法原理 血液培養基是一種含有脫纖維動物血（一般用兔血或羊血）的牛肉膏蛋白胨培養基，因此除培養細菌所需要的各種營養外，還能提供輔酶（如V因子），血紅素（X因子)等特殊生長因子。 因此血液培養基常用于培養，分離和保存對營養要求苛刻的某些病原微生物。此外，這種培養基還可用來測定細菌的溶血作用。
實驗材料 兔羊
試劑、試劑盒 牛肉膏蛋白胨培養基
儀器、耗材 三角瓶平皿注射器
實驗步驟
一、血液培養基配方
二、器材
1. 培養基
牛肉膏蛋白胨培養基。
2. 儀器或其他用具
裝有5~10粒玻璃珠的無菌三角瓶，無菌注射器，無血平皿等。
3. 動物
健康的兔或羊。
三、操作步驟
牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基的制備（見實驗牛肉膏蛋白胨培養基）。
2. 無菌脫纖維兔血（或羊血）的制備
用配備18號針頭的注射器以無菌操作抽取全血（無菌采血操作見實驗動物的注射），并立即注人裝有無菌玻璃珠（約3 mm）的無菌三角瓶中，然后搖動三角瓶10 min左右，形成的纖維蛋白塊會沉淀在玻璃珠上，把含血細胞和血清的上清液傾人無菌容器即得到脫纖維兔血（或羊血）置冰箱備用。
整個過程必須嚴格無菌操作，制備脫纖維血液時，應搖動足夠時間以防凝固。
3. 將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基溶化，待冷至45 ℃時，以無菌操作按10%加人無菌脫纖維兔血（或羊血）于培養基中，立即搖蕩，以便血液和培養基充分混勻。
35-45℃時加入血液是為了保存其中某些不耐熱的營養物質和保存血細胞的完整，以便于觀察細菌的溶血作用。同時，在這種溫度時瓊脂不會凝固。
4. 迅速以無菌操作倒入無菌平皿中，使成血液瓊脂平板。注意不要產生氣泡。
5. 置37℃過夜，如無菌生長即可使用。
