RT-PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)別分析
點(diǎn)擊次數(shù)：340 更新時(shí)間：2024-06-12
rtpcr和實(shí)時(shí)熒光定量pcr區(qū)別如下：
1、所說(shuō)的PCR應(yīng)該就是最常規(guī)的PCR，以DNA為模板，通過(guò)上下游引物，實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。
2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR（reverse transcription），盡管有些資料上說(shuō)實(shí)時(shí)熒光定量PCR也（realtime fluores-cence quantitative PCR）也簡(jiǎn)稱(chēng)RT-PCR，但是這是不對(duì)的，不推薦。
基本操作過(guò)程是將所提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后將所獲得的cDNA作為模板，設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，是一種檢測(cè)基因表達(dá)的常用方法。
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR也就是Real-Time PCR，其最大的作用是檢測(cè)樣品中的初始DNA濃度。
至于三者的關(guān)系，RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR應(yīng)該都屬于PCR，在RNA實(shí)驗(yàn)中，這二者都會(huì)應(yīng)用到。
例如你要比較2個(gè)組織中的某基因的表達(dá)差異，首先你要提取2個(gè)組織的總RNA，然后通過(guò)RT-PCR檢測(cè)該基因是否在2個(gè)組織中有表達(dá)，然后通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定該基因在2個(gè)組織中的表達(dá)量是否具有顯著性差異。
