上海遠慕生物科技有限公司

    上海遠慕生物科技是家專業供應進口/國產ELISA試劑盒的優質供應商，提供人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說明書，以及酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒，培養基，抗體，動物血清，標準品，化學試劑，實驗耗材，細胞株，其他實驗試劑及實驗品，ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物，咨詢！

    產品中文名：人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒

    產品英文名：Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit

    規格：96T/48T

    保存：2-8℃

    貨號：YM-S0069

    使用范圍：僅供科研檢測，不得用于臨床。

    服務承諾：工作時間內免費的技術咨詢和指導 。我們的銷售工程師經過專業培訓的，將為您提供滿意的產品和真誠的服務。

    特點：

    一、高效、靈敏、特異的抗體；

    二、穩定的重復性和可靠性；

    三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

    四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；

    五、節省實驗經費。

   人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說明書 操作注意事項：

    試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

    實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

    不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

    使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

    加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒說明書 原理技術原理：

    （1）抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

    （2）結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。

    （3）酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。

    （4）受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。

    （5）此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。

    （6）加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。

    在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：

    （1）固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。

    （2）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好，吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響，一般多采用4℃ 18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg/ml。

    （3）酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。

    （4）酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

    檢測范圍和靈敏度不同，用量少時，可使用分裝，前期是它的長久性不是很好。

    試劑盒的標準曲線點OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。

    試劑盒的標準曲線相關系數R≥0.98。

    試劑盒重復性好，板內、板間變異系數均<9 %。

    試劑的組份都多給20%的富余量，確保完成48/96孔的檢測，避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。

    檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適（均為1:30）， 方便試驗操作者準確地做稀釋工作，保證實驗結果的重復性

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